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溫郁金石油醚部位抗抑郁作用藥效學研究

發布時間:2021-05-26 10:11所屬分類:預防醫學加入收藏

摘 要:應用利血平拮抗模型,研究溫郁金石油醚部位抗抑郁藥效,通過強迫游泳等行為學指標以及拮抗利血平實驗結果,評價溫郁金各濃度組抗抑郁作用

  摘 要:應用利血平拮抗模型,研究溫郁金石油醚部位抗抑郁藥效,通過強迫游泳等行為學指標以及拮抗利血平實驗結果,評價溫郁金各濃度組抗抑郁作用,觀察不同濃度溫郁金石油醚部位對抑郁小鼠的抗抑郁作用。在強迫游泳實驗和懸尾實驗中,中、高濃度的溫郁金均能顯著減少小鼠的不動時間(P<0.05或P<0.01);在糖水偏好實驗中,溫郁金的中、高濃度顯著地增加糖水偏好值(P<0.01);在拮抗利血平實驗中,中、高濃度的溫郁金均能顯著地拮抗利血平所誘導的小鼠眼瞼下垂(P<0.01)和運動不能現象。結果表明:溫郁金石油醚提取物具有抗抑郁作用,實驗中,石油醚提取物劑量0.338g/kg為抗抑郁最佳劑量。

  關鍵詞:溫郁金;利血平;抗抑郁,藥效學

醫藥論文發表

  在中醫理論認為抑郁癥屬于“郁證、不寐、臟躁”的范疇,其病理機制[1]為氣機失調,內氣積滯,導致肝氣郁結,心神失養。溫郁金作為“浙八味”之一,在中醫配方[2]中應用已逾千年,具有行氣解郁、清心涼血、利膽退黃的功效,用于疏肝理氣解郁為主要療效的中藥復方以及中藥,其抗抑郁作用已受到學者們的關注。

  溫郁金于治療抑郁癥的復方中出現的頻率較高。趙錚蓉[3]等人等人溫郁金抗抑郁活性部位篩選的研究結果顯示,抗抑郁作用效果明顯,其中,石油醚和乙酸乙酯萃取后的部分效果顯著。為了深入探究藥效學關系,以溫郁金石油醚萃取物研究抗抑郁作用,為尋找、開發中藥抗抑郁新藥提供思路。

  1 材料與儀器

  1.1 材料與試劑

  溫郁金,姜科植物溫郁金(Curcumawenyujin Y. H. Chen et C. Ling)的干燥塊根(寧波藥材公司),懸尾箱(自制),利血平(天津金耀藥業有限公司),鹽酸氟西汀(蘇州中化藥品工業有限公司),所有試劑均為國產分析純。

  1.2 儀器與設備

  旋轉蒸發儀(N-1100S 上海愛朗儀器有限公司);電子天平(奧豪斯儀器有限公司)等。

  1.3 試驗動物

  清潔級昆明(KM)小鼠,20±2g,雌雄各半,共108只,由長春醫學動物實驗研究中心提供。

  2 方法與結果

  溫郁金干燥塊根,用95%的乙醇回流提取(料液比為1∶10),減壓回收乙醇后得到溫郁金乙醇提取物浸膏,以熱水溶解,石油醚多次萃取,合并萃取液,濃縮,浸膏得率為1.69%,以吐溫-80溶解備用,配制成按生藥量[3]計:10g/kg(低),20g/kg(中),40g/kg(高)三組濃度備用。取試驗小鼠,平衡飲食3d后,按性別體重隨機分為空白對照組、模型組、陽性對照組、溫郁金低、中、高濃度組,共六組,具體見表1。

  分組后,對小鼠按照安排進行灌胃給藥,2次/d,按0.2mL/10g灌服,于每天上午8∶00,下午2∶00進行,連續14d。

  2.1 強迫游泳實驗

  末次給藥1h后,隨機取各組小鼠六只,置于水深10cm,恒溫(25±1℃)池中,從入水開始計時,進行6min的強迫游泳,觀察并記錄其后4min的不動時間,不動判定標準:小鼠不再主動掙扎、不扭動,結果見表2。

  由表2可知,溫郁金中濃度組優于低、高濃度組,其抗抑郁作用最為顯著。對比空白對照組,溫郁金石油醚提取物各濃度組,陽性對照組的小鼠強迫游泳的時間均明顯降低,具有統計學意義(P<0.05或P<0.01)。與模型組相對比,溫郁金石油醚提取物各濃度組,陽性對照組小鼠強迫游泳時間均顯著的減少,實驗結果具有統計學差異(P<0.01)。

  2.2 懸尾實驗

  常與強迫游泳實驗聯合,以“行為組學”形式[4]共同評價,各組隨機另取六只小鼠,末次給藥1h后,距尾尖部2cm處,將小鼠用膠帶系緊,倒掛在密閉的不透光箱子(20cm×20cm×30cm)中,其頭部距箱底約5cm,呈倒掛狀態,從懸掛開始計時6min,觀察并記錄其后4min的不動時間(以小鼠主動停止掙扎,懸掛不扭動判定為不動),結果見表3。

  由表3可知,溫郁金中濃度組優于低、高濃度組,其抗抑郁作用最為顯著。對比空白對照組,溫郁金石油醚提取物的各濃度組,陽性對照組的小鼠懸尾時間均顯著的減少,具有統計學意義(P<0.05或P<0.01)。與模型組相對比,溫郁金各濃度組,陽性對照組的小鼠懸尾時間均顯著的減少,具有統計學差異(P<0.01)。

  2.3 糖水偏好實驗

  糖水偏好實驗[5-7]可以反映動物內源性抑郁癥的中心癥狀,即快感缺失。首先于安靜環境內訓練小鼠適應糖水性,在每籠中放置2個相同水瓶,首次一天內,2瓶中均裝1%蔗糖水200mL;第2天,將另一瓶換成等重純水。

  禁食禁水24h后,放置200mL的1%蔗糖水一瓶和等重純水一瓶,1h后,分別稱重2個水瓶,以糖水和純水的減失量計算糖水偏好指數,糖水偏好指數%=糖水消耗量/(糖水消耗量+純水消耗量)×100%[8],結果見表4。

  由表4可知,溫郁金高濃度組優于中、低濃度組,其抗抑郁作用最為顯著。對比空白對照組,溫郁金石油醚提取物各濃度組,陽性對照組及模型組小鼠的糖水偏好指數均顯著的減少,具有統計學意義(P<0.01)。與模型組相對比,溫郁金石油醚提取物各濃度組,陽性對照組及空白對照組小鼠糖水偏好指數均顯著增加,具有統計學差異(P<0.05或P<0.01)。

  2.4 拮抗利血平實驗

  以眼瞼下垂、運動不能進行考察。眼瞼下垂觀測:各組取六只小鼠[9],腹腔注射利血平1h后,將小鼠單個豎直垂放15s,觀測小鼠眼瞼下垂的程度,按照評分標準打分。

  評分標準[10]:眼瞼全部睜開為0分,3/4睜開為1分,1/2睜開為2分,1/4睜開為3分,不睜開為4分。運動不能觀測:取眼瞼下垂觀測后的小鼠[11],放入直徑為7.5cm的圓圈內,觀察并記錄15s內出圈次數。試驗結果見表5。

  由表5可知,溫郁金高濃度組優于中、低濃度組,其抗抑郁作用最為顯著。對比空白對照組,溫郁金石油醚提取物各濃度組,陽性對照組及模型組小鼠眼瞼下垂評分均顯著升高,具有統計學意義(P<0.01)。與模型組相對比,溫郁金石油醚提取物中濃度組和高濃度組,陽性對照組及空白對照組小鼠眼瞼下垂評分均顯著降低,具有統計學差異(P<0.05或P<0.01)。與模型組相比較,溫郁金石油醚提取物中、高濃度組可顯著提高小鼠出圈率,其中中濃度組抗抑郁效果最為顯著。

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